Tha an nematode giuthais na endoparasite imrich cuarantain a tha aithnichte a dh’ adhbhraicheas call mòr eaconamach ann an eag-shiostaman coille giuthais. Bidh an sgrùdadh làithreach a’ dèanamh lèirmheas air gnìomhachd nematicidal indoles halogenated an aghaidh nematodes giuthais agus an dòigh gnìomh aca. Bha na gnìomhan nematicidal de 5-iodoindole agus avermectin (smachd adhartach) an aghaidh nematodes giuthais coltach agus àrd aig dùmhlachd ìosal (10 μg / mL). Lùghdaich 5-iodoindole fecundity, gnìomhachd gintinn, bàsmhorachd embryoneach agus larbha, agus giùlan locomotor. Tha eadar-obrachaidhean moileciuil de ligands le gabhadairean seanail cloride le glutamate sònraichte neo-dhruim-altachain a’ toirt taic don bheachd gu bheil 5-iodoindole, mar avermectin, a’ ceangal gu teann ris an làrach gabhadain gnìomhach. Thug 5-Iodoindole cuideachd a-steach grunn deformations phenotypic ann an nematodes, a’ toirt a-steach tuiteam / crìonadh organan neo-àbhaisteach agus barrachd falamhachadh. Tha na co-dhùnaidhean sin a’ moladh gum faodadh àite a bhith aig vacuoles ann am bàs nematode-meadhanaichte le methylation. Gu cudromach, bha 5-iodoindole neo-phuinnseanta don dà ghnè planntrais (càl agus radish). Mar sin, tha an sgrùdadh seo a’ sealltainn gum faod cleachdadh iodoindole fo chumhachan àrainneachd smachd a chumail air leòn giuthais.
Buinidh nematode fiodha giuthais (Bursaphelenchus xylophilus) do na nematodes coille giuthais (PWN), nematodes endoparasitic imrich a tha aithnichte a dh’ adhbharaicheas fìor mhilleadh eag-eòlasach air eag-shiostaman coille giuthais1. Tha galar giuthais giuthais (PWD) air adhbhrachadh le nematode coille giuthais a’ fàs na dhuilgheadas mòr air grunn mòr-thìrean, a’ gabhail a-steach Àisia agus an Roinn Eòrpa, agus ann an Ameireaga a Tuath, bidh an nematode a’ sgrios gnèithean giuthais1,2 a chaidh a thoirt a-steach. Tha crìonadh chraobhan giuthais na phrìomh dhuilgheadas eaconamach, agus tha an dùil gun tèid a sgaoileadh air feadh na cruinne3. Mar as trice bidh an nematode a’ toirt ionnsaigh air na gnèithean giuthais a leanas: Pinus densiflora, Pinus sylvestris, Pinus thunbergii, Pinus koraiensis, Pinus thunbergii, Pinus thunbergii, agus Pinus radiata4. Is e fìor ghalar a th’ ann an nematode giuthais a dh’ fhaodas craobhan giuthais a mharbhadh taobh a-staigh seachdainean no mìosan às deidh an galar. A bharrachd air an sin, tha briseadh a-mach nematode giuthais cumanta ann an grunn eag-shiostaman, agus mar sin chaidh slabhraidhean gabhaltachd leantainneach a stèidheachadh1.
Tha Bursaphelenchus xylophilus na nematode plannt-parasitic cuarantain a bhuineas don superfamily Aphelenchoidea agus clade 102.5. Bidh an nematode a’ biathadh air fungasan agus a’ gintinn ann am figheagan fiodha nan craobhan giuthais, a’ fàs gu ceithir diofar ìrean larbha: L1, L2, L3, L4 agus inbheach fa leth1,6. Fo chumhachan gainnead bìdh, bidh an nematode giuthais a’ dol gu ìre larbha sònraichte - dauer, a bhios a’ dìosganachadh a vectar - an daolag rùsg giuthais (Monochamus alternatus) agus ga ghluasad gu craobhan giuthais fallain. Ann an luchd-aoigheachd fallain, bidh nematodes a 'gluasad gu luath tro fhigheagan lusan agus a' biathadh air ceallan parenchymatous, a tha a 'leantainn gu grunn ath-bheachdan hypersensitivity, fàsachadh giuthais agus bàs taobh a-staigh bliadhna an dèidh galar1,7,8.
Tha smachd bith-eòlasach air nematodes giuthais air a bhith na dhùbhlan o chionn fhada, le ceumannan cuarantain a’ dol air ais chun 20mh linn. Tha ro-innleachdan gnàthach airson smachd a chumail air nematodes giuthais gu sònraichte a’ toirt a-steach làimhseachadh ceimigeach, a’ toirt a-steach ceò fiodha agus cuir nematicides a-steach do stocan chraobhan. Is e na nematicides as cumanta a thathas a’ cleachdadh avermectin agus avermectin benzoate, a bhuineas don teaghlach avermectin. Tha na ceimigean daor sin fìor èifeachdach an aghaidh mòran de ghnèithean nematode agus thathas den bheachd gu bheil iad sàbhailte don àrainneachd9. Ach, thathar an dùil gun cruthaich cleachdadh tric de na nematicides sin cuideam taghaidh a bheir gu cinnteach nochdadh nematodes giuthais resistant, mar a chaidh a dhearbhadh airson grunn phlàighean biastagan, leithid Leptinotarsa decemlineata, Plutella xylostella agus na nematodes Trichostrongylus colubriformis agus Ostertagia circumc Incta, a tha air fàs mean air mhean an aghaidh 1.1.1. Mar sin, feumar sgrùdadh cunbhalach a dhèanamh air pàtrain dìon agus nematicides a sgrùdadh gu leantainneach gus ceumannan eile, cosg-èifeachdach agus càirdeil don àrainneachd a lorg gus smachd a chumail air PVD. Anns na deicheadan mu dheireadh, tha grunn ùghdaran air moladh a bhith a’ cleachdadh earrannan planntrais, olan riatanach agus luaineach mar riochdairean smachd nematode13,14,15,16.
O chionn ghoirid sheall sinn gnìomhachd nematicidal indole, moileciuil comharran eadar-cheallach agus eadar-ghnèitheach, ann an Caenorhabditis elegans 17 . Tha Indole na chomharradh intracellular farsaing ann an eag-eòlas microbial, a’ cumail smachd air grunn ghnìomhan a bheir buaidh air eòlas-eòlas microbial, cruthachadh spòran, seasmhachd plasmid, strì an aghaidh dhrogaichean, cruthachadh biofilm, agus fòirneart 18, 19. Cha deach sgrùdadh a dhèanamh air gnìomhachd indole agus na toraidhean aige an aghaidh nematodes pathogenic eile. Anns an sgrùdadh seo, rinn sinn sgrùdadh air gnìomhachd nematicidal de 34 indoles an aghaidh nematodes giuthais agus shoilleirich sinn dòigh gnìomh an 5-iodoindole as cumhachdaiche a’ cleachdadh microscopy, togail dhealbhan ùine, agus deuchainnean docaigeadh moileciuil, agus rinn sinn measadh air na buaidhean puinnseanta aige air planntaichean a’ cleachdadh measadh ginideachadh sìl.
Thathas air aithris roimhe gu bheil dùmhlachd àrd (> 1.0 mM) de indole a’ toirt buaidh nematicidal air nematodes17. Às deidh làimhseachadh B. xylophilus (ìrean beatha measgaichte) le indole no 33 derivatives indole eadar-dhealaichte aig 1 mM, chaidh bàsmhorachd B. xylophilus a thomhas le bhith a ‘cunntadh nematodes beò agus marbh anns na buidhnean smachd agus làimhseachadh. Sheall còig indoles gnìomhachd nematicidal cudromach; bha mairsinn na buidhne smachd gun làimhseachadh 95 ± 7% às deidh 24 h. De na 34 indoles a chaidh a dhearbhadh, dh’ adhbhraich 5-iodoindole agus 4-fluoroindole aig 1 mM bàs 100%, ach dh’ adhbhraich 5,6-difluoroindigo, methylindole-7-carboxylate, agus 7-iodoindole bàs timcheall air 50% (Clàr 1).
Buaidh 5-iodoindole air cruthachadh vacuole agus metabolism nematode fiodha giuthais. (A) Buaidh avermectin agus 5-iodoindole air nematodes fireann inbheach, (B) uighean nematode ìre L1 agus (C) metabolism B. xylophilus, (i) cha deach vacuoles fhaicinn aig 0 h, lean làimhseachadh gu (ii) vacuoles, (iii) cruinneachadh de vacuoles iomadach, (iv) vacuoleswelling, (iv) vacuoleswelling, (iv) falamhachadh. vacuoles agus (vi) cruthachadh vacuoles mòra. Tha saighdean dearga a’ comharrachadh sèid ann am vacuoles, tha saighdean gorm a’ nochdadh measgachadh de vacuoles agus saighdean dubha a’ comharrachadh falamh mòra. Bàr sgèile = 50 μm.
A bharrachd air an sin, thug an sgrùdadh seo cunntas cuideachd air a’ phròiseas sreathach de bhàs air adhbhrachadh le meatan ann an nematodes giuthais (Figear 4C). Is e bàs cealla neo-apoptotic a th’ ann am bàs methanogenic co-cheangailte ri cruinneachadh vacuoles cytoplasmic follaiseach27. Tha coltas gu bheil dlùth-cheangal aig na h-uireasbhaidhean moirfeòlais a chaidh an sgrùdadh ann an nematodes giuthais ris an dòigh anns a bheil bàs meatan air adhbhrachadh. Sheall sgrùdadh microscopach aig diofar amannan gun deach vacuoles mòra a chruthachadh às deidh 20 h de bhith fosgailte do 5-iodoindole (0.1 mM). Chaidh vacuoles microscopach fhaicinn às deidh 8 h de làimhseachadh, agus chaidh an àireamh aca suas às deidh 12 h. Chaidh grunn vacuoles mòra fhaicinn an dèidh 14 h. Bha grunn vacuoles fuasgailte rim faicinn gu soilleir às deidh 12-16 h de làimhseachadh, a’ nochdadh gur e fusion vacuole bunait an uidheamachd bàis methanogenic. Às deidh 20 uair a thìde, chaidh grunn vacuoles mòra a lorg air feadh na cnuimhe. Tha na beachdan sin a’ riochdachadh a’ chiad aithisg air metuosis ann an C. elegans.
Ann an cnuimhean a chaidh a làimhseachadh le 5-iodoindole, chaidh co-chruinneachadh vacuole agus aimhreit fhaicinn cuideachd (Fig. 5), mar a chithear le bhith a 'lùbadh cnuimhean agus a' leigeil a-mach falamh dhan àrainneachd. Chaidh briseadh falamh fhaicinn cuideachd ann am membran slige na h-uighean, a tha mar as trice air a ghleidheadh slàn le L2 nuair a chaidh breith (Fig. S2 a bharrachd). Tha na beachdan sin a’ toirt taic do bhith an sàs ann an cruinneachadh lionn agus fàilligeadh osmoregulatory, a bharrachd air dochann cealla reversible (RCI), ann am pròiseas cruthachadh vacuole agus suppuration (Fig. 5).
A’ toirt beachd air àite iodine ann an cruthachadh vacuole a chaidh fhaicinn, rinn sinn sgrùdadh air gnìomhachd nematicidal sodium iodide (NaI) agus potasium iodide (KI). Ach, aig co-chruinneachaidhean (0.1, 0.5 no 1 mM), cha tug iad buaidh air an dàrna cuid mairsinn nematode no cruthachadh vacuole (Fig. S5 a bharrachd), ged a bha beagan buaidh nematicidal aig 1 mM KI. Air an làimh eile, thug 7-iodoindole (1 no 2 mM), mar 5-iodoindole, iomadach vacuoles agus deformations structarail (Fig. S6 a bharrachd). Sheall an dà iodondoles feartan phenotypic co-chosmhail ann an nematodes giuthais, ach cha do rinn NaI agus KI. Gu inntinneach, cha do dh'adhbhraich indole cruthachadh vacuole ann am B. xylophilus aig na co-chruinneachaidhean a chaidh a dhearbhadh (chan eil dàta air a shealltainn). Mar sin, dhearbh na toraidhean gu bheil an iom-fhillte indole-iodine an urra ri falamhachadh agus metabolism B. xylophilus.
Am measg nan indoles a chaidh a dhearbhadh airson gnìomhachd nematicidal, bha an clàr-amais as àirde de -5.89 kcal / mol aig 5-iodoindole, air a leantainn le 7-iodoindole (-4.48 kcal / mol), 4-fluoroindole (-4.33), agus indole (-4.03) (Figear 6). Tha an ceangal làidir de haidridean cnàimh-droma de 5-iodoindole gu leucine 218 a’ bunailteachadh a cheangail, ach tha a h-uile toradh indole eile a’ ceangal ri serine 260 tro bannan hydrogen slabhraidh taobh. Am measg iodoindoles modail eile, tha luach ceangail de -5.248 kcal/mol aig 2-iodoindole, a tha mar thoradh air a phrìomh cheangal haidridean le leucine 218. Am measg nan ceanglan aithnichte eile tha 3-iodoindole (-4.3 kcal/mol), 4-iodoindole (-4.0 kcal/moloin-cal), agus (Figear Leasachail S8). Tha a’ mhòr-chuid de indoles halogenated agus indole fhèin, ach a-mhàin 5-iodoindole agus 2-iodoindole, a’ dèanamh ceangal le serine 260. Tha an fhìrinn gu bheil ceangal hydrogen le leucine 218 na chomharradh air ceangaltas gabhadan-ligand èifeachdach, mar a chaidh fhaicinn airson ivermectin (Fig. Supplementary Fig. S7), a’ dearbhadh sin. ivermectin, ceangail gu teann ri làrach gnìomhach an receptor GluCL tro leucine 218 (Fig. 6 agus Fig. S8). Tha sinn a’ moladh gum feumar an ceangal seo gus structar pore fosgailte an iom-fhillte GluCL a chumail suas agus le bhith a’ ceangal gu teann ri làrach gnìomhach an receptor GluCL, 5-iodoindole, 2-iodoindole, avermectin agus ivermectin mar sin a’ cumail an t-sianail ian fosgailte agus a’ leigeil le gabhail lionn.
Docaigeadh moileciuil de indole agus indole halogenated gu GluCL. Treòrachadh ceangail de (A) indole, (B) 4-fluoroindole, (C) 7-iodoindole, agus (D) ligands 5-iodoindole gu làrach gnìomhach GluCL. Tha am pròtain air a riochdachadh le rioban, agus tha na bannan hydrogen cnàimh-droma air an sealltainn mar loidhnichean dotagach buidhe. Tha (A′), (B′), (C′), agus (D′) a’ sealltainn eadar-obrachadh nan ligands co-fhreagarrach leis na fuigheall aminoideach mun cuairt, agus tha na bannan haidridean taobh-slabhraidh air an comharrachadh le saigheadan dotagach pinc.
Chaidh deuchainnean a dhèanamh gus measadh a dhèanamh air buaidh puinnseanta 5-iodoindole air ginideachadh sìol càl agus radish. Cha robh mòran buaidh aig 5-iodoindole (0.05 no 0.1 mM) no avermectin (10 μg / mL) air ginideachadh tùsail agus nochdadh planntrais (Figear 7). A bharrachd air an sin, cha deach eadar-dhealachadh mòr sam bith a lorg eadar ìre ginideachadh smachdan gun làimhseachadh agus sìol air a làimhseachadh le 5-iodoindole no avermectin. Cha robh a’ bhuaidh air leudachadh taproot agus an àireamh de fhreumhan taobhach a chaidh a chruthachadh ach beag, ged a chuir 1 mM (10 tursan an dùmhlachd gnìomhach) de 5-iodoindole beagan dàil air leasachadh freumhaichean taobhach. Tha na co-dhùnaidhean sin a 'sealltainn gu bheil 5-iodoindole neo-phuinnseanta do cheallan lusan agus nach eil e a' cur bacadh air pròiseasan leasachadh lusan aig na co-chruinneachaidhean a chaidh a sgrùdadh.
Buaidh 5-iodoindole air ginideachadh sìol. Gintinn, sprouting agus freumhachadh fadalach de shìol B. oleracea agus R. raphanistrum air meadhan Murashige agus Skoog agar le no às aonais avermectin no 5-iodoindole. Chaidh ginideachadh a chlàradh às deidh 3 latha de dh’ goir aig 22 ° C.
Tha an sgrùdadh seo ag aithris grunn chùisean de mharbhadh nematode le indoles. Gu cudromach, is e seo a’ chiad aithisg air iodoindole ag adhbhrachadh methylation (pròiseas air adhbhrachadh le cruinneachadh vacuoles beaga a bhios mean air mhean a’ tighinn còmhla gu bhith nan vacuoles mòra, a’ leantainn gu briseadh membran agus bàs) ann an snàthadan giuthais, le iodoindole a’ nochdadh feartan nematicid cudromach coltach ri feartan an nematicide malairteach avermectin.
Thathas ag aithris roimhe seo gu bheil indoles a’ coileanadh iomadh gnìomh comharrachaidh ann am prokaryotes agus eukaryotes, a’ toirt a-steach casg / cruthachadh biofilm, mairsinn bacteriach, agus pathogenicity19,32,33,34. O chionn ghoirid, tha na buaidhean teirpeach a dh’ fhaodadh a bhith aig indoles halogenated, alkaloids indole, agus derivatives indole semisynthetic air ùidh mhòr a tharraing ann an rannsachadh35,36,37. Mar eisimpleir, thathas air sealltainn gu bheil indoles halogenated a’ marbhadh ceallan leantainneach Escherichia coli agus Staphylococcus aureus37. A bharrachd air an sin, tha e inntinneach gu saidheansail sgrùdadh a dhèanamh air èifeachd indoles halogenated an aghaidh gnèithean, ginean agus rìoghachdan eile, agus tha an sgrùdadh seo na cheum a dh’ ionnsaigh an amas seo a choileanadh.
An seo, tha sinn a’ moladh inneal airson bàsmhorachd 5-iodoindole-brosnaichte ann an C. elegans stèidhichte air dochann cealla reversible (RCI) agus methylation (Figearan 4C agus 5). Tha atharrachaidhean edematous leithid puffiness agus crìonadh vacuolar nan comharran de RCI agus methylation, air am foillseachadh mar vacuoles mòra anns an cytoplasm48,49. Bidh RCI a’ cur bacadh air cinneasachadh lùtha le bhith a’ lughdachadh cinneasachadh ATP, ag adhbhrachadh fàilligeadh air pumpa ATPase, no a’ cur dragh air buill-bodhaig cealla agus ag adhbhrachadh sruthadh a-steach luath de Na +, Ca2+, agus uisge50,51,52. Bidh vacuoles intracytoplasmic ag èirigh ann an ceallan bheathaichean mar thoradh air cruinneachadh lionn anns an cytoplasm mar thoradh air sruthadh a-steach Ca2+ agus uisge53. Gu h-inntinneach, tha an uidheamachd seo de mhilleadh cealla air a thionndadh air ais ma tha am milleadh sealach agus na ceallan a’ tòiseachadh a’ toirt a-mach ATP airson ùine shònraichte, ach ma mhaireas am milleadh no ma dh’ fhàsas e nas miosa, gheibh na ceallan bàs.54 Tha ar beachdan a’ sealltainn nach urrainn nematodes air an làimhseachadh le 5-iodoindole biosynthesis àbhaisteach a thoirt air ais às deidh dhaibh a bhith fosgailte do dhuilgheadasan cuideam.
Dh'fhaodadh gu bheil an phenotype methylation air adhbhrachadh le 5-iodoindole ann am B. xylophilus mar thoradh air làthaireachd iodine agus a chuairteachadh molecular, oir bha nas lugha de bhuaidh bacadh aig 7-iodoindole air B. xylophilus na 5-iodoindole (Clàr 1 agus Figear Leasachail S6). Tha na toraidhean sin gu ìre co-chòrdail ri sgrùdaidhean Maltese et al. (2014). Tha na h-eadar-obrachaidhean eadar indoles indole no halogenated agus gabhadairean GluCL a chaidh fhaicinn san sgrùdadh seo cuideachd a’ toirt taic don bheachd seo, leis gun deach 5- agus 2-iodoindole a lorg a’ ceangal ri gabhadairean GluCL nas làidire na na indoles eile a chaidh a sgrùdadh (Figear 6 agus Figear Leasachail S8). Chaidh an iodine aig an dàrna no an còigeamh suidheachadh den indole a lorg mar cheangal ri leucine 218 den ghlacadair GluCL tro bannan haidridean cnàimh-droma, ach tha indoles halogenated eile agus indole fhèin a’ cruthachadh bannan haidridean taobh-slabhraidh lag le serine 260 (Figear 6). Mar sin tha sinn a’ dèanamh a-mach gu bheil àite cudromach aig àiteachadh an halogen ann a bhith a’ toirt a-steach crìonadh falamh, ach tha ceangal teann 5-iodoindole a’ cumail an t-sianail ion fosgailte, agus mar sin a’ leigeil le sruthadh a-steach luath agus vacuole. Ach, tha an dòigh gnìomh mionaideach de 5-iodoindole fhathast ri dhearbhadh.
Mus tèid 5-iodoindole a chur an sàs gu practaigeach, bu chòir a bhuaidh phuinnseanta air lusan a sgrùdadh. Sheall na deuchainnean ginideachadh sìol againn nach robh droch bhuaidh aig 5-iodoindole air ginideachadh sìol no pròiseasan leasachaidh às dèidh sin aig na dùmhlachdan a chaidh a sgrùdadh (Figear 7). Mar sin, tha an sgrùdadh seo a’ toirt seachad bunait airson 5-iodoindole a chleachdadh san àrainneachd eag-eòlasach gus smachd a chumail air cron nematodes giuthais do chraobhan giuthais.
Tha aithisgean roimhe seo air sealltainn gu bheil leigheas stèidhichte air indole a’ riochdachadh dòigh-obrach a dh’ fhaodadh a bhith ann airson dèiligeadh ri duilgheadas strì an aghaidh antibiotic agus adhartas aillse55. A bharrachd air an sin, tha gnìomhan antibacterial, anticancer, antioxidant, anti-inflammatory, antidiabetic, anti-bhìorasach, antiproliferative agus antituberculosis aig indoles agus faodaidh iad a bhith nam bunait gealltanach airson leasachadh dhrogaichean56,57. Tha an sgrùdadh seo a’ moladh airson a’ chiad uair cleachdadh iodine mar àidseant antiparasitic agus anthelmintic.
Chaidh Avermectin a lorg o chionn trì deicheadan agus choisinn e an Duais Nobel ann an 2015, agus tha a chleachdadh mar anthelmintic fhathast a’ dol air adhart. Ach, mar thoradh air leasachadh luath an aghaidh avermectins ann an nematodes agus plàighean bhiastagan, tha feum air ro-innleachd eile, cosgais ìseal agus càirdeil don àrainneachd gus smachd a chumail air galar PWN ann an craobhan giuthais. Tha an sgrùdadh seo cuideachd ag aithris air an dòigh anns am bi 5-iodoindole a’ marbhadh nematodes giuthais agus gu bheil puinnseanta ìosal aig 5-iodoindole do cheallan planntrais, a tha a’ fosgladh deagh chothroman airson a chleachdadh malairteach san àm ri teachd.
Chaidh a h-uile deuchainn aontachadh le Comataidh Beusachd Oilthigh Yeungnam, Gyeongsan, Korea, agus chaidh na modhan a dhèanamh a rèir stiùiridhean Comataidh Beusachd Oilthigh Yeungnam.
Chaidh deuchainnean goir uighean a dhèanamh a’ cleachdadh mhodhan stèidhichte43. Gus measadh a dhèanamh air ìrean goir (HR), chaidh nematodes inbheach 1-latha (timcheall air 100 boireann agus 100 fireannach) a ghluasad gu soithichean Petri anns an robh am fungas agus leig leotha fàs airson 24 h. Bha uighean an uairsin air an dealachadh agus air an làimhseachadh le 5-iodoindole (0.05 mM agus 0.1 mM) no avermectin (10 μg / ml) mar chasg ann an uisge grùide sterile. Chaidh na crochaidhean sin (500 μl; timcheall air uighean 100) a ghluasad gu tobraichean truinnsear cultair clò 24-tobar agus chaidh an goir aig 22 ° C. Chaidh cunntasan L2 a dhèanamh às deidh 24 h de goir ach bhathas den bheachd gun robh iad marbh mura do ghluais na ceallan nuair a chaidh am brosnachadh le uèir platanam grinn. Chaidh an deuchainn seo a dhèanamh ann an dà ìre, gach fear le sia ath-aithris. Chaidh an dàta bhon dà dheuchainn a chur còmhla agus a thaisbeanadh. Tha an àireamh sa cheud de HR air a thomhas mar a leanas:
Chaidh bàsmhorachd larbha a mheasadh a’ cleachdadh modhan a chaidh a leasachadh roimhe. Chaidh uighean nematode a chruinneachadh agus chaidh embryons a shioncronachadh le bhith a’ breith ann an uisge grùide sterile gus larbha ìre L2 a ghineadh. Chaidh larbha sioncronaich (mu 500 nematodes) a làimhseachadh le 5-iodoindole (0.05 mM agus 0.1 mM) no avermectin (10 μg/ml) agus air an àrach air lannan B. cinerea Petri. Às deidh 48 h de ghoir aig 22 ° C, chaidh nematodes a chruinneachadh ann an uisge grùide sterile agus sgrùdadh airson làthaireachd ìrean L2, L3, agus L4. Bha làthaireachd ìrean L3 agus L4 a’ comharrachadh cruth-atharrachadh larbha, ach cha do chomharraich làthaireachd ìre L2 cruth-atharrachadh sam bith. Chaidh dealbhan fhaighinn a’ cleachdadh an t-Siostam Ìomhaigh Ceall Didseatach iRiS ™. Chaidh an deuchainn seo a dhèanamh ann an dà ìre, gach fear le sia ath-aithris. Chaidh an dàta bhon dà dheuchainn a chur còmhla agus a thaisbeanadh.
Chaidh puinnseanta 5-iodoindole agus avermectin gu sìol a mheasadh le bhith a’ cleachdadh deuchainnean ginideachadh air truinnsearan agar Murashige agus Skoog.62 B. oleracea agus sìol R. raphanistrum air am bogadh an toiseach ann an uisge grùide sterile airson aon latha, air a nighe le 1 ml 100% ethanol, air a sterilachadh le sodium 1 ml 3 min, sterilized bleach 1% malairteach (1 ml) bleach 1 ml 3 malairteach. agus air a nighe còig tursan le 1 ml de dh'uisge teann. Chaidh na sìol sterilized an uairsin a bhrùthadh air lannan ginideachadh agar anns an robh 0.86 g / l (0.2X) meadhanach Murashige agus Skoog agus 0.7% agar bacteriòlach le no às aonais 5-iodoindole no avermectin. Bha na truinnsearan an uairsin air an goir aig 22 ° C, agus chaidh dealbhan a thogail às deidh 3 latha de goir. Chaidh an deuchainn seo a dhèanamh ann an dà ìre, agus bha sia ath-aithris aig gach fear dhiubh.
Ùine puist: 26-26/2025