'S e endoparasite imrich cuarantine a th' anns an nematode giuthais a tha aithnichte airson call eaconamach mòr adhbhrachadh ann an eag-shiostaman coille giuthais. Tha an sgrùdadh seo a’ dèanamh ath-sgrùdadh air gnìomhachd nematicidal indoles halogenated an aghaidh nematodes giuthais agus an dòigh-obrach aca. Bha gnìomhachd nematicidal 5-iodoindole agus avermectin (smachd dearbhach) an aghaidh nematodes giuthais coltach ri chèile agus àrd aig dùmhlachdan ìosal (10 μg / mL). Lùghdaich 5-iodoindole torachas, gnìomhachd gintinn, bàsmhorachd embryonic agus larbha, agus giùlan locomotor. Tha eadar-obrachaidhean moileciuil ligands le gabhadairean seanail clòraid le geataichean glutamate sònraichte do neo-dhruim-altachain a’ toirt taic don bheachd gu bheil 5-iodoindole, mar avermectin, a’ ceangal gu teann ris an làrach gnìomhach gabhadair. Dh’ adhbhraich 5-Iodoindole cuideachd diofar deformachaidhean fenotypic ann an nematodes, a’ gabhail a-steach tuiteam / crìonadh organ neo-àbhaisteach agus barrachd vacuolization. Tha na toraidhean seo a’ moladh gum faodadh vacuoles pàirt a ghabhail ann am bàs air adhbhrachadh le methylation nematode. Gu cudromach, cha robh 5-iodoindole puinnseanta do gach gnè planntrais (càl agus raidis). Mar sin, tha an sgrùdadh seo a’ sealltainn gum faod cleachdadh iodoindole fo chumhachan àrainneachdail smachd a chumail air milleadh crìonadh giuthais.
Buinidh nematode fiodha giuthais (Bursaphelenchus xylophilus) do na nematodes fiodha giuthais (PWN), nematodes endoparasitic imrich a tha aithnichte airson milleadh eag-eòlasach mòr adhbhrachadh do eag-shiostaman coille giuthais1. Tha galar crìonadh giuthais (PWD) air adhbhrachadh leis an nematode fiodha giuthais a’ sìor fhàs na dhuilgheadas mòr air grunn mhòr-thìrean, nam measg Àisia agus an Roinn Eòrpa, agus ann an Ameireaga a Tuath, bidh an nematode a’ sgrios ghnèithean giuthais a chaidh a thoirt a-steach1,2. Tha crìonadh chraobhan giuthais na dhuilgheadas eaconamach mòr, agus tha an dùil gun sgaoil e air feadh an t-saoghail draghail3. Is iad na gnèithean giuthais a leanas as trice a tha air an ionnsaigh leis an nematode: Pinus densiflora, Pinus sylvestris, Pinus thunbergii, Pinus koraiensis, Pinus thunbergii, Pinus thunbergii, agus Pinus radiata4. Tha nematode giuthais na ghalar mòr a dh’ fhaodas craobhan giuthais a mharbhadh taobh a-staigh seachdainean no mìosan bho bhith air an galar. A bharrachd air an sin, tha briseadh a-mach nematode giuthais cumanta ann an grunn eag-shiostaman, agus mar sin tha slabhraidhean gabhaltachd leantainneach air an stèidheachadh1.
'S e nematode parasitigeach planntrais a th' ann am Bursaphelenchus xylophilus a bhuineas don teaghlach mhòr Aphelenchoidea agus clade 102.5. Bidh an nematode ag ithe fungasan agus ag iomadachadh ann am figheagan fiodha chraobhan giuthais, a' leasachadh gu ceithir ìrean larbha eadar-dhealaichte: L1, L2, L3, L4 agus neach inbheach1,6. Fo chumhachan gainnead bìdh, bidh an nematode giuthais a' dol gu ìre larbha sònraichte - dauer, a bhios a' parasitachadh a vectar - daolag rùsg a' ghiuthais (Monochamus alternatus) agus ga ghluasad gu craobhan giuthais fallain. Ann an aoighean fallain, bidh nematodes a' gluasad gu luath tro fhigheagan planntrais agus ag ithe cheallan parenchymatous, a tha ag adhbhrachadh grunn ath-bhualaidhean cus mothachaidh, crìonadh giuthais agus bàs taobh a-staigh bliadhna às deidh galar1,7,8.
Tha smachd bith-eòlasach air nematodan giuthais air a bhith na dhùbhlan o chionn fhada, le ceumannan cuarantain a’ dol air ais chun 20mh linn. Tha ro-innleachdan gnàthach airson nematodan giuthais a smachdachadh sa mhòr-chuid a’ toirt a-steach leigheasan ceimigeach, a’ gabhail a-steach smùideadh fiodha agus cur nematicides ann an stocan chraobhan. Is e avermectin agus avermectin benzoate na nematicides as cumanta a thathas a’ cleachdadh, a bhuineas don teaghlach avermectin. Tha na ceimigean daor seo gu math èifeachdach an aghaidh mòran ghnèithean nematode agus thathas den bheachd gu bheil iad sàbhailte don àrainneachd9. Ach, thathar an dùil gun cruthaich cleachdadh ath-aithris nan nematicides seo cuideam taghaidh a bhios cha mhòr cinnteach a’ leantainn gu nochdadh nematodes giuthais a tha an aghaidh an aghaidh, mar a chaidh a dhearbhadh airson grunn phlàighean bhiastagan, leithid Leptinotarsa decemlineata, Plutella xylostella agus na nematodes Trichostrongylus colubriformis agus Ostertagia circumcincta, a tha air strì an aghaidh avermectins a leasachadh mean air mhean10,11,12. Mar sin, feumar pàtrain strì an aghaidh a sgrùdadh gu cunbhalach agus sgrìonadh leantainneach a dhèanamh air nematod gus ceumannan eile, cosg-èifeachdach agus càirdeil don àrainneachd a lorg gus PVD a smachdachadh. Anns na deicheadan mu dheireadh, tha grunn ùghdaran air moladh gun tèid earrannan planntrais, olan riatanach agus stuthan luaineach a chleachdadh mar riochdairean smachd nematode13,14,15,16.
O chionn ghoirid sheall sinn gnìomhachd nematicidal indole, moileciuil comharran eadar-cheallach agus eadar-rìoghachdan, ann an Caenorhabditis elegans 17. Tha indole na chomharra intracellular farsaing ann an eag-eòlas meanbh-fhàs-bheairtean, a’ cumail smachd air grunn ghnìomhan a bheir buaidh air fiseòlas meanbh-fhàs-bheairtean, cruthachadh spòran, seasmhachd plasmid, strì an aghaidh dhrogaichean, cruthachadh biofilm, agus puinnseantachd 18, 19. Cha deach gnìomhachd indole agus a thoraidhean an aghaidh nematodes pathogenic eile a sgrùdadh. Anns an sgrùdadh seo, rinn sinn sgrùdadh air gnìomhachd nematicidal 34 indoles an aghaidh nematodes giuthais agus shoilleirich sinn meacanaig gnìomh an 5-iodoindole as cumhachdaiche a’ cleachdadh maicreasgopaidh, dealbhan-camara ùine-sgrios, agus deuchainnean docaidh moileciuil, agus rinn sinn measadh air a bhuaidhean puinnseanta air lusan a’ cleachdadh deuchainn ginideachadh sìol.
Chaidh aithris roimhe seo gu bheil buaidh nematicidal aig dùmhlachdan àrda (>1.0 mM) de indole air nematodes17. Às dèidh làimhseachadh B. xylophilus (ìrean beatha measgaichte) le indole no 33 diofar thoradh indole aig 1 mM, chaidh bàsmhorachd B. xylophilus a thomhas le bhith a’ cunntadh nematodes beò is marbh anns na buidhnean smachd agus làimhseachaidh. Sheall còig indoles gnìomhachd nematicidal cudromach; b’ e mairsinneachd na buidhne smachd gun làimhseachadh 95 ± 7% às dèidh 24 uair. De na 34 indoles a chaidh a dhearbhadh, dh’ adhbhraich 5-iodoindole agus 4-fluoroindole aig 1 mM bàsmhorachd 100%, ach dh’ adhbhraich 5,6-difluoroindigo, methylindole-7-carboxylate, agus 7-iodoindole bàsmhorachd timcheall air 50% (Clàr 1).
Buaidh 5-iodoindole air cruthachadh falamh agus metabolism nematode giuthais. (A) Buaidh avermectin agus 5-iodoindole air nematodes fireann inbheach, (B) uighean nematode ìre L1 agus (C) metabolism B. xylophilus, (i) cha deach falamh fhaicinn aig 0 uair, dh’ adhbhraich làimhseachadh (ii) falamh, (iii) cruinneachadh iomadh falamh, (iv) at falamh, (v) co-aonadh falamh agus (vi) cruthachadh falamh mòra. Tha saighdean dearga a’ comharrachadh at falamh, saighdean gorma a’ comharrachadh co-aonadh falamh agus saighdean dubha a’ comharrachadh falamh mòra. Bàr-sgèile = 50 μm.
A bharrachd air an sin, mhìnich an sgrùdadh seo cuideachd am pròiseas sreathmhor de bhàs air adhbhrachadh le meatàn ann an nematodan giuthais (Figear 4C). Tha bàs meatanogineach na sheòrsa neo-apoptotic de bhàs cealla co-cheangailte ri cruinneachadh vacuoles siotoplasmach follaiseach27. Tha e coltach gu bheil na lochdan morf-eòlach a chithear ann an nematodan giuthais ceangailte gu dlùth ri meacanaig bàs air adhbhrachadh le meatàn. Sheall sgrùdadh microscopach aig diofar amannan gun deach vacuoles mòra a chruthachadh an dèidh 20 uair de nochdadh do 5-iodoindole (0.1 mM). Chaidh vacuoles microscopach fhaicinn an dèidh 8 uairean de làimhseachadh, agus mheudaich an àireamh aca an dèidh 12 uair. Chaidh grunn vacuoles mòra fhaicinn an dèidh 14 uair. Bha grunn vacuoles co-aonaichte rim faicinn gu soilleir an dèidh 12–16 uairean de làimhseachadh, a’ nochdadh gur e co-aonadh vacuole bunait a’ mheacanaig bàis meatanogineach. An dèidh 20 uair, chaidh grunn vacuoles mòra a lorg air feadh a’ chnuimh. Tha na beachdan sin a’ riochdachadh a’ chiad aithisg air metuosis ann an C. elegans.
Ann an cnuimhean air an làimhseachadh le 5-iodoindole, chaidh cruinneachadh agus briseadh falamh fhaicinn cuideachd (Figear 5), mar a chithear le lùbadh cnuimhean agus leigeil ma sgaoil falamh dhan àrainneachd. Chaidh briseadh falamh fhaicinn cuideachd ann am membran slige ugh, a bhios mar as trice air a ghleidheadh slàn le L2 rè breith (Figear a bharrachd S2). Tha na beachdan sin a’ toirt taic do chom-pàirt cruinneachadh lionn agus fàilligeadh osmoregulatory, a bharrachd air dochann cealla reversible (RCI), ann am pròiseas cruthachadh falamh agus suppuration (Figear 5).
A’ cur beachd air àite iodine ann an cruthachadh nam vacuoles a chaidh fhaicinn, rinn sinn sgrùdadh air gnìomhachd nematicidal iodide sodium (NaI) agus iodide potasium (KI). Ach, aig dùmhlachdan (0.1, 0.5 no 1 mM), cha do chuir iad buaidh air mairsinn nematode no cruthachadh vacuoles (Figear a bharrachd S5), ged a bha beagan buaidh nematicidal aig 1 mM KI. Air an làimh eile, dh’ adhbhraich 7-iodoindole (1 no 2 mM), mar 5-iodoindole, iomadh vacuole agus deformachaidhean structarail (Figear a bharrachd S6). Sheall an dà iodoindole feartan fenotypic coltach ri chèile ann an nematodes giuthais, ach cha do rinn NaI agus KI. Gu inntinneach, cha do bhrosnaich indole cruthachadh vacuole ann am B. xylophilus aig na dùmhlachdan a chaidh a dhearbhadh (dàta gun a shealltainn). Mar sin, dhearbh na toraidhean gur e an co-thàthadh indole-iodine a tha an urra ri vacuolization agus metabolism B. xylophilus.
Am measg nan indoles a chaidh a dhearbhadh airson gnìomhachd nematicidal, b’ e 5-iodoindole an clàr-amais sleamhnachaidh as àirde de -5.89 kcal/mol, agus an uair sin 7-iodoindole (-4.48 kcal/mol), 4-fluoroindole (-4.33), agus indole (-4.03) (Figear 6). Bidh an ceangal haidridean làidir aig 5-iodoindole ri leucine 218 a’ daingneachadh a cheangail, ach bidh a h-uile toradh indole eile a’ ceangal ri serine 260 tro cheanglaichean haidridean slabhraidh taobh. Am measg iodoindoles eile a chaidh a mhodaladh, tha luach ceangail de -5.248 kcal/mol aig 2-iodoindole, a tha mar thoradh air a phrìomh cheangal haidridean le leucine 218. Am measg cheanglaichean aithnichte eile tha 3-iodoindole (-4.3 kcal/mol), 4-iodoindole (-4.0 kcal/mol), agus 6-fluoroindole (-2.6 kcal/mol) (Figear a bharrachd S8). Bidh a’ mhòr-chuid de na h-indolan halogenichte agus an indole fhèin, ach a-mhàin 5-iodoindole agus 2-iodoindole, a’ cruthachadh ceangal le serine 260. Tha an fhìrinn gu bheil ceangal haidridean le leucine 218 a’ nochdadh ceangal èifeachdach gabhadair-ligand, mar a chaidh fhaicinn airson ivermectin (Figear a bharrachd S7), a’ dearbhadh gu bheil 5-iodoindole agus 2-iodoindole, mar ivermectin, a’ ceangal gu teann ri làrach gnìomhach gabhadair GluCL tro leucine 218 (Figear 6 agus Figear a bharrachd S8). Tha sinn a’ moladh gu bheil feum air a’ cheangal seo gus structar pore fosgailte a’ cho-thàthaidh GluCL a chumail suas agus le bhith a’ ceangal gu teann ri làrach gnìomhach gabhadair GluCL, bidh 5-iodoindole, 2-iodoindole, avermectin agus ivermectin a’ cumail an t-sianal ian fosgailte agus a’ leigeil le lionntan a dhol a-steach.
Ceangal moileciuil indole agus indole halogenichte ri GluCL. Treòrachadh ceangail ligands (A) indole, (B) 4-fluoroindole, (C) 7-iodoindole, agus (D) 5-iodoindole ri làrach ghnìomhach GluCL. Tha am pròtain air a riochdachadh le rioban, agus tha na ceanglaichean haidridean cnàimh-droma air an sealltainn mar loidhnichean dotaichte buidhe. Tha (A′), (B′), (C′), agus (D′) a’ sealltainn eadar-obrachadh nan ligands co-fhreagarrach leis na fuigheallan amino-aigéid mun cuairt, agus tha na ceanglaichean haidridean slabhraidh-taobh air an comharrachadh le saighdean dotaichte pinc.
Chaidh deuchainnean a dhèanamh gus measadh a dhèanamh air buaidh puinnseanta 5-iodoindole air germachadh sìol càl is raidis. Cha robh buaidh mhòr aig 5-iodoindole (0.05 no 0.1 mM) no avermectin (10 μg/mL) air germachadh tùsail agus nochdadh planntrais (Figear 7). A bharrachd air an sin, cha deach eadar-dhealachadh mòr sam bith a lorg eadar ìre germachaidh smachdan gun làimhseachadh agus sìol air an làimhseachadh le 5-iodoindole no avermectin. Cha robh buaidh mhòr aig a’ bhuaidh air leudachadh freumhaichean agus an àireamh de fhreumhan taobhach a chaidh a chruthachadh, ged a chuir 1 mM (10 uiread an dùmhlachd gnìomhach aige) de 5-iodoindole dàil bheag air leasachadh freumhaichean taobhach. Tha na toraidhean seo a’ nochdadh nach eil 5-iodoindole puinnseanta do cheallan planntrais agus nach eil e a’ cur bacadh air pròiseasan leasachaidh planntrais aig na dùmhlachdan a chaidh a sgrùdadh.
Buaidh 5-iodoindole air germachadh sìol. Germachadh, fàs agus freumhachadh taobhach sìol B. oleracea agus R. raphanistrum air meadhan agar Murashige agus Skoog le no às aonais avermectin no 5-iodoindole. Chaidh germachadh a chlàradh an dèidh 3 latha de ghoir aig 22°C.
Tha an sgrùdadh seo ag aithris grunn chùisean de mharbhadh nematode le indoles. Gu cudromach, is e seo a’ chiad aithisg air iodoindole ag adhbhrachadh methylation (pròiseas air adhbhrachadh le cruinneachadh vacuoles beaga a bhios mean air mhean a’ tighinn còmhla gu bhith nan vacuoles mòra, a’ leantainn gu briseadh membran agus bàs) ann an snàthadan giuthais, le iodoindole a’ nochdadh feartan nematicid cudromach coltach ri feartan an nematicide malairteach avermectin.
Chaidh aithris roimhe seo gu bheil iomadh gnìomh comharran aig indoles ann am prokaryotes agus eukaryotes, a’ gabhail a-steach casg/cruthachadh biofilm, mairsinneachd bacterial, agus pathogenicity19,32,33,34. O chionn ghoirid, tha buaidhean leigheasach a dh’ fhaodadh a bhith aig indoles halogenated, alcaloids indole, agus toraidhean indole leth-shintéiseach air ùidh mhòr a tharraing ann an rannsachadh35,36,37. Mar eisimpleir, chaidh a shealltainn gu bheil indoles halogenated a’ marbhadh ceallan Escherichia coli agus Staphylococcus aureus maireannach37. A bharrachd air an sin, tha e inntinneach saidheansail sgrùdadh a dhèanamh air èifeachdas indoles halogenated an aghaidh gnèithean, genera, agus rìoghachdan eile, agus tha an sgrùdadh seo na cheum a dh’ionnsaigh an amas seo a choileanadh.
An seo, tha sinn a’ moladh dòigh-obrach airson bàsmhorachd air adhbhrachadh le 5-iodoindole ann an C. elegans stèidhichte air dochann cealla reversible (RCI) agus methylation (Figearan 4C agus 5). Tha atharrachaidhean edematous leithid at agus crìonadh vacuolar nan comharran air RCI agus methylation, air an nochdadh mar vacuoles mòra anns an cytoplasm48,49. Bidh RCI a’ cur bacadh air cinneasachadh lùtha le bhith a’ lughdachadh cinneasachadh ATP, ag adhbhrachadh fàilligeadh pumpa ATPase, no a’ cur dragh air membran cealla agus ag adhbhrachadh sruthadh a-steach luath de Na+, Ca2+, agus uisge50,51,52. Bidh vacuoles intracytoplasmic ag èirigh ann an ceallan bheathaichean mar thoradh air cruinneachadh lionn anns an cytoplasm mar thoradh air sruthadh a-steach Ca2+ agus uisge53. Gu inntinneach, tha an dòigh-obrach seo airson milleadh ceallan air ais-thionndaidh ma tha am milleadh sealach agus ma thòisicheas na ceallan a’ dèanamh ATP airson ùine shònraichte, ach ma mhaireas am milleadh no ma dh’fhàsas e nas miosa, bàsaichidh na ceallan.54 Tha na beachdan againn a’ sealltainn nach urrainn do nematodan a chaidh an làimhseachadh le 5-iodoindole bith-cho-chur àbhaisteach ath-nuadhachadh às deidh dhaibh a bhith fosgailte do chumhachan cuideam.
Dh’fhaodadh am fenotaip methylation air adhbhrachadh le 5-iodoindole ann am B. xylophilus a bhith mar thoradh air làthaireachd iodine agus a sgaoileadh moileciuil, leis gu robh nas lugha de bhuaidh bacaidh aig 7-iodoindole air B. xylophilus na bha aig 5-iodoindole (Clàr 1 agus Figear Taiceil S6). Tha na toraidhean seo gu ìre co-chòrdail ri sgrùdaidhean Maltese et al. (2014), a thug cunntas air gun do chuir gluasad a’ phàirt pyridyl nitrogen ann an indole bhon phara- chun an meta-suidheachadh às do vacuolization, casg fàis, agus citotoxicity ann an ceallan U251, a’ moladh gu bheil eadar-obrachadh a’ mholaciul le làrach ghnìomhach sònraichte anns a’ phròtain deatamach27,44,45. Tha na h-eadar-obrachaidhean eadar indole no indoles halogenated agus gabhadairean GluCL a chaidh fhaicinn san sgrùdadh seo cuideachd a’ toirt taic don bheachd seo, leis gun deach a lorg gu robh 5- agus 2-iodoindole a’ ceangal ri gabhadairean GluCL nas làidire na na indoles eile a chaidh a sgrùdadh (Figear 6 agus Figear Taiceil S8). Chaidh faighinn a-mach gu robh an iodine aig an dàrna no an còigeamh suidheachadh den indole a’ ceangal ri leucine 218 den gabhadair GluCL tro cheanglaichean haidridean cnàimh-droma, ach bidh indoles halogenichte eile agus an indole fhèin a’ cruthachadh ceanglaichean haidridean slabhraidh-taobh lag le serine 260 (Figear 6). Mar sin tha sinn a’ beachdachadh gu bheil àiteachadh an halogen a’ cluich pàirt chudromach ann a bhith ag adhbhrachadh crìonadh vacuolar, ach gu bheil ceangal teann 5-iodoindole a’ cumail an t-sianal ian fosgailte, agus mar sin a’ leigeil le sruthadh luath lionn agus briseadh vacuole. Ach, chan eil dòigh-obrach mionaideach 5-iodoindole air a dhearbhadh fhathast.
Mus tèid 5-iodoindole a chur an sàs gu practaigeach, bu chòir a bhuaidh phuinnseanta air lusan a sgrùdadh. Sheall na deuchainnean ginideachadh sìol againn nach robh droch bhuaidh aig 5-iodoindole air ginideachadh sìol no pròiseasan leasachaidh às dèidh sin aig na dùmhlachdan a chaidh a sgrùdadh (Figear 7). Mar sin, tha an sgrùdadh seo a’ toirt seachad bunait airson 5-iodoindole a chleachdadh san àrainneachd eag-eòlasach gus smachd a chumail air cron nematodes giuthais do chraobhan giuthais.
Tha aithisgean roimhe air sealltainn gu bheil leigheas stèidhichte air indole a’ riochdachadh dòigh-obrach a dh’ fhaodadh a bhith ann airson dèiligeadh ri duilgheadas strì an aghaidh antibiotics agus adhartas aillse55. A bharrachd air an sin, tha gnìomhachd antibacterial, anticancer, antioxidant, anti-inflammatory, antidiabetic, antiviral, antiproliferative agus antituberculosis aig indoles agus dh’ fhaodadh e a bhith na bhunait gealltanach airson leasachadh dhrogaichean56,57. Tha an sgrùdadh seo a’ moladh airson a’ chiad uair gum faodadh iodine a bhith air a chleachdadh mar àidseant antiparasitic agus anthelmintic.
Chaidh Avermectin a lorg trì deicheadan air ais agus choisinn e Duais Nobel ann an 2015, agus tha a chleachdadh mar anthelmintic fhathast a’ dol air adhart gu gnìomhach. Ach, air sgàth leasachadh luath strì an aghaidh avermectins ann an nematodes agus plàighean bhiastagan, tha feum air ro-innleachd eile, aig prìs ìseal agus càirdeil don àrainneachd gus smachd a chumail air galar PWN ann an craobhan giuthais. Tha an sgrùdadh seo cuideachd ag aithris air an dòigh anns a bheil 5-iodoindole a’ marbhadh nematodes giuthais agus gu bheil puinnseanta ìosal aig 5-iodoindole do cheallan planntrais, a tha a’ fosgladh deagh chothroman airson a chleachdadh malairteach san àm ri teachd.
Chaidh a h-uile deuchainn aontachadh le Comataidh Beusachd Oilthigh Yeungnam, Gyeongsan, Coirea, agus chaidh na modhan a dhèanamh a rèir stiùiridhean Comataidh Beusachd Oilthigh Yeungnam.
Chaidh deuchainnean goir uighean a dhèanamh a’ cleachdadh modhan stèidhichte43. Gus ìrean goir (HR) a mheasadh, chaidh nematodan inbheach 1-latha a dh'aois (timcheall air 100 boireannach agus 100 fireannach) a ghluasad gu soithichean Petri anns an robh am fungas agus leig iad leotha fàs airson 24 uair a thìde. An uairsin chaidh na h-uighean a sgaradh agus an làimhseachadh le 5-iodoindole (0.05 mM agus 0.1 mM) no avermectin (10 μg/ml) mar fhuasgladh ann an uisge grùide sterile. Chaidh na crochaidhean sin (500 μl; timcheall air 100 ugh) a ghluasad gu tobraichean truinnsear cultar clò 24-tobair agus gan goir aig 22 °C. Chaidh cunntasan L2 a dhèanamh às deidh 24 uair a thìde de ghoir ach chaidh am meas marbh mura do ghluais na ceallan nuair a chaidh an brosnachadh le uèir platanam mìn. Chaidh an deuchainn seo a dhèanamh ann an dà ìre, gach fear le sia ath-aithris. Chaidh an dàta bhon dà dheuchainn a chur còmhla agus a thaisbeanadh. Tha ceudad HR air a thomhas mar a leanas:
Chaidh bàsmhorachd larbha a mheasadh le bhith a’ cleachdadh dhòighean-obrach a chaidh a leasachadh roimhe. Chaidh uighean nematode a chruinneachadh agus chaidh suthaichean a shioncronachadh le bhith gan goir ann an uisge grùide sterile gus larbha ìre L2 a ghineadh. Chaidh larbha sioncronaichte (timcheall air 500 nematode) a làimhseachadh le 5-iodoindole (0.05 mM agus 0.1 mM) no avermectin (10 μg/ml) agus an togail air pleitean B. cinerea Petri. Às dèidh 48 uair a thìde de ghoir aig 22 °C, chaidh nematodes a chruinneachadh ann an uisge grùide sterile agus chaidh an sgrùdadh airson làthaireachd ìrean L2, L3, agus L4. Chomharraich làthaireachd ìrean L3 agus L4 cruth-atharrachadh larbha, ach chomharraich làthaireachd ìre L2 nach robh cruth-atharrachadh ann. Chaidh ìomhaighean fhaighinn le bhith a’ cleachdadh Siostam Ìomhaighean Cealla Didseatach iRiS™. Chaidh an deuchainn seo a dhèanamh ann an dà ìre, gach fear le sia ath-aithris. Chaidh an dàta bhon dà dheuchainn a chur còmhla agus a thaisbeanadh.
Chaidh puinnseanta 5-iodoindole agus avermectin do shìol a mheasadh le bhith a’ cleachdadh deuchainnean ginideachaidh air pleitean agar Murashige agus Skoog.62 Chaidh sìol B. oleracea agus R. raphanistrum a bogadh an toiseach ann an uisge grùide sterile airson aon latha, an nighe le 1 ml de ethanol 100%, an sterilachadh le 1 ml de bleach malairteach 50% (3% sodium hypochlorite) airson 15 mionaidean, agus an nighe còig tursan le 1 ml de dh’uisge sterile. An uairsin chaidh na sìol sterilichte a bhrùthadh air pleitean agar ginideachaidh anns an robh 0.86 g/l (0.2X) meadhan Murashige agus Skoog agus 0.7% agar bacteriòlach le no às aonais 5-iodoindole no avermectin. An uairsin chaidh na pleitean a ghoir aig 22 °C, agus chaidh ìomhaighean a thogail às deidh 3 latha de ghoir. Chaidh an deuchainn seo a dhèanamh ann an dà ìre, agus bha sia ath-aithrisean anns gach fear dhiubh.
Àm puist: 26 Gearran 2025