Stuthan planntrais is pathogens
Chaidh sluagh mapadh comann sorghum ris an canar sluagh tionndaidh sorghum (SCP) a thoirt seachad le Dr. Pat Brown aig Oilthigh Illinois (a-nis aig UC Davis). Chaidh a mhìneachadh roimhe agus tha e na chruinneachadh de loidhnichean eadar-mheasgte air an tionndadh gu neo-mhothachail air photoperiod agus meud nas lugha gus fàs is leasachadh nan lusan ann an àrainneachdan na SA a dhèanamh nas fhasa. Chaidh 510 loidhnichean bhon t-sluagh seo a chleachdadh san sgrùdadh seo ged a chaidh na loidhnichean uile a chleachdadh ann an sgrùdadh nan trì feartan air sgàth droch ghineadh agus cùisean smachd càileachd eile. Mu dheireadh, chaidh dàta bho 345 loidhnichean a chleachdadh airson mion-sgrùdadh freagairt chitin, 472 loidhnichean airson freagairt flg22, agus 456 airson strì an aghaidh TLS.B. cookeiFhuaireadh an seòrsa LSLP18 bhon Dr. Burt Bluhm aig Oilthigh Arkansas.
Tomhas freagairt MAMP
Chaidh dà MAMP eadar-dhealaichte a chleachdadh san sgrùdadh seo flg22, (catalog Genscript # RP19986), agus chitin. Chaidh lusan sorghum fhàs ann an cuir-a-steach air an cur air raointean làn ùir (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) anns an taigh-glainne. Chaidh na lusan uisgeachadh an latha mus deach an sampall a chruinneachadh gus casg a chuir air taiseachd a bharrachd bho na duilleagan air latha an tional.
Chaidh na loidhnichean a chur air thuaiream agus, air adhbharan solarachaidh, chaidh an cur ann am baidsean de 60 loidhne. Airson gach loidhne, chaidh trì 'poitean' a chur le dà shìol gach loidhne. Chaidh baidsean às dèidh sin a chur cho luath 's a chaidh am baidse roimhe a phròiseasadh gus an deach am poball gu lèir a mheasadh. Chaidh dà ruith deuchainneach a dhèanamh airson an dà MAMP le genotypes air an ath-chur air thuaiream anns gach aon den dà ruith.
Chaidh deuchainnean ROS a dhèanamh mar a chaidh a mhìneachadh roimhe. Gu h-aithghearr, airson gach loidhne, chaidh sia sìol a chur ann an 3 poitean eadar-dhealaichte. Bho na sìol-chraobhan a thàinig às, chaidh trì a thaghadh stèidhichte air cunbhalachd. Cha deach sìol-chraobhan a bha a’ coimhead neo-àbhaisteach no a bha gu math nas àirde no nas giorra na a’ mhòr-chuid a chleachdadh. Chaidh ceithir diosgan duille de thrast-thomhas 3 mm a thoirt a-mach às a’ phàirt as leatha den 4mh duilleag de thrì lusan sorghum 15 latha a dh'aois. Aon diosc gach duilleag bho dhà lus agus dà dhiosca bho aon lus, leis an dàrna diosc mar smachd uisge (faic gu h-ìosal). Chaidh na diosgan a shnàmh leotha fhèin air 50 µl H20 ann am plàta dubh 96-tobar, air an seuladh le ròn alùmanum gus nach biodh iad fosgailte do sholas, agus air an cumail aig teòthachd an t-seòmair thar oidhche. An ath mhadainn chaidh fuasgladh ath-bhualadh a dhèanamh le bhith a’ cleachdadh probe chemiluminescent 2 mg/ml L-012 (Wako, àireamh catalog 120-04891), 2 mg/ml peroxidase horseradish (Seòrsa VI-A, Sigma-Aldrich, àireamh catalog P6782), agus 100 mg/ml Chitin no 2 μM de Flg22. Chaidh 50 µl den fhuasgladh ath-bhualadh seo a chur ri trì de na ceithir tobraichean. B’ e smachd magadh a bh’ anns a’ cheathramh tobar, agus chaidh am fuasgladh ath-bhualadh às aonais an MAMP a chur ris. Bha ceithir tobraichean bàn anns nach robh ach uisge anns gach plàta cuideachd.
Às dèidh an fhuasgladh ath-bhualaidh a chur ris, chaidh an deàrrsadh a thomhas le bhith a’ cleachdadh leughadair meanbh-phlàta ioma-lorg SynergyTM 2 (BioTek) a h-uile 2 mhionaid airson 1 uair. Bidh an leughadair plàta a’ gabhail tomhais deàrrsadh a h-uile 2 mhionaid rè na h-uaire seo. Chaidh suim nan 31 leughadh uile obrachadh a-mach gus an luach airson gach tobar fhaighinn. Chaidh an luach measta airson freagairt MAMP airson gach genotype obrachadh a-mach mar (luach cuibheasach deàrrsadh nan trì tobraichean deuchainneach—luach an tobair mhagaidh) - nas lugha na luach cuibheasach an tobair bhàn. Bha luachan nan tobraichean bàn an-còmhnaidh faisg air neoni.
Diosgan duilleachNicotiana benthamiana, chaidh aon loidhne sorghum le freagairt àrd (SC0003), agus aon loidhne sorghum le freagairt ìosal (PI 6069) a ghabhail a-steach cuideachd mar smachdan anns gach plàta 96-tobar airson adhbharan smachd càileachd.
B. cookeiullachadh inoculum agus inoculation
B. cookeiChaidh inoculum ullachadh mar a chaidh a mhìneachadh roimhe. Gu h-aithghearr, chaidh gràinnean sorghum a bogadh ann an uisge airson trì latha, an sruthladh, an cur ann am flasgaichean còn 1L agus an cur ann an autoclave airson uair a thìde aig 15psi agus 121 °C. An uairsin chaidh na gràinnean a inoculachadh le mu 5 ml de mycelia macerated bho chultar ùr deB. cookeiTha LSLP18 air a sgaradh agus air fhàgail airson 2 sheachdain aig teòthachd an t-seòmair, a’ crathadh nam flasgaichean a h-uile 3 latha. Às dèidh 2 sheachdain, chaidh na gràinnean sorghum air an robh fungas a thiormachadh san adhar agus an uairsin gan stòradh aig 4 °C gus an deach an cur san raon. Chaidh an aon inoculum a chleachdadh airson an deuchainn gu lèir agus chaidh a dhèanamh ùr gach bliadhna. Airson inoculum, chaidh 6–10 gràinnean air an robh galair a chur ann an cuairt de lusan sorghum 4–5 seachdainean a dh'aois. Thòisich na spòran a chaidh a thoirt a-mach bho na fungasan sin galar anns na lusan sorghum òga taobh a-staigh seachdain.
Ullachadh sìol
Mus deach sìol sorghum a chur san achadh, chaidh a làimhseachadh le measgachadh de dh’fhungas-bhiastagan, de dh’fhungas-bhiastagan, agus de dh’fhungas-bhiastagan anns an robh ~ 1% de dh’fhungas-bhiastagan Spirato 480 FS, 4% de dh’fhungas-bhiastagan Sebring 480 FS, agus 3% de dh’fhungas-bhiastagan sìl Sorpro 940 ES. An uairsin chaidh na sìol a thiormachadh san adhar airson 3 latha, agus chuir sin còmhdach tana den mheasgachadh seo timcheall nan sìol. Leig an dìon-bhiastagan leinn an luibh-bhiastagan Dual Magnum a chleachdadh mar làimhseachadh ro-nochdadh.
Measadh air strì an aghaidh spotan duilleag targaid
Chaidh an SCP a chur aig Stèisean Rannsachaidh Bhàrr Meadhanach ann an Clayton, Carolina a Tuath air 14–15 Ògmhios 2017 agus 20 Ògmhios 2018 ann an dealbhadh bloca coileanta air thuaiream le dà ath-aithris deuchainneach anns gach cùis. Chaidh deuchainnean a chur ann an sreathan singilte 1.8 m le leud sreath 0.9 m a’ cleachdadh 10 sìol gach plota. Chaidh dà shreath crìche a chur timcheall air iomall gach deuchainn gus casg a chuir air buaidhean oir. Chaidh na deuchainnean a bhanachdach air 20 Iuchar 2017 agus 20 Iuchar 2018 agus aig an ìre sin bha na lusan sorghum aig ìre fàis 3. Chaidh rangachadh a thoirt air sgèilean aon gu naoi, far an deach lusan gun chomharran galair a sgòradh mar naoi agus lusan gu tur marbh a sgòradh mar aon. Chaidh dà rangachadh a thoirt ann an 2017 agus ceithir leughaidhean ann an 2018 a’ tòiseachadh dà sheachdain às deidh a’ bhanachdach gach bliadhna. Chaidh sAUDPC (raon àbhaisteach fo lùb adhartais galair) obrachadh a-mach mar a chaidh a mhìneachadh roimhe.
Àm postaidh: 1 Giblean 2021