Rinn an sgrùdadh seo measadh air bàsmhorachd, sublethality, agus puinnseanta malairteachcypermethrinfoirmleachaidhean gu ceann-phollain anuranach. Anns an deuchainn acute, chaidh co-chruinneachaidhean de 100-800 μg / L a dhearbhadh airson 96 h. Anns an deuchainn leantainneach, chaidh co-chruinneachaidhean cypermethrin a tha a ’tachairt gu nàdarra (1, 3, 6, agus 20 μg / L) a dhearbhadh airson bàsmhorachd, air a leantainn le deuchainn micronucleus agus ana-cainnt niùclasach cealla fola dearga airson làithean 7. B’ e an LC50 de chumadh cypermethrin malairteach gu ceann-phòla 273.41 μg L -1. Anns an deuchainn leantainneach, lean an dùmhlachd as àirde (20 μg L−1) gu bàs nas motha na 50%, leis gun do mharbh e leth de na ceann-phollain a chaidh a dhearbhadh. Sheall an deuchainn micronucleus toraidhean cudromach aig 6 agus 20 μg L−1 agus chaidh grunn ana-cainnt niùclasach a lorg, a’ nochdadh gu bheil comas genotoxic an aghaidh P. gracilis ann an cruthachadh cypermethrin malairteach. Tha cypermethrin na chunnart àrd don ghnè seo, a’ nochdadh gum faod e grunn dhuilgheadasan adhbhrachadh agus buaidh a thoirt air daineamaigs an eag-shiostam seo sa gheàrr-ùine agus san fhad-ùine. Mar sin, faodar a cho-dhùnadh gu bheil buaidhean puinnseanta aig cruthachaidhean cypermethrin malairteach air P. gracilis.
Mar thoradh air leudachadh leantainneach de ghnìomhachd àiteachais agus cleachdadh dian desmachd air plàigheanceumannan, bidh beathaichean uisgeach gu tric fosgailte do phuinnseanan 1,2. Faodaidh truailleadh stòrasan uisge faisg air raointean àiteachais buaidh a thoirt air leasachadh agus mairsinneachd fàs-bheairtean nach eil nan targaidean leithid muir-thìrich.
Tha muir-thìrich a’ sìor fhàs cudromach ann am measadh matrices àrainneachd. Thathas den bheachd gu bheil Anurans nan comharran bith-eòlach math air truailleadh àrainneachdail air sgàth am feartan sònraichte leithid cearcallan beatha iom-fhillte, ìrean fàis larbha luath, inbhe trophic, craiceann permeable10,11, eisimeileachd air uisge airson gintinn12 agus uighean gun dìon11,13,14. Thathas air sealltainn gu bheil an losgann beag uisge (Physalaemus gracilis), ris an canar gu tric an losgann gul, na ghnè bith-chomharran de thruailleadh puinnseanan4,5,6,7,15. Tha an gnè ri lorg ann an uisgeachan seasmhach, raointean dìon no sgìrean le àrainn caochlaideach ann an Argentina, Uruguaidh, Paraguay agus Brazil1617 agus tha e air a mheas seasmhach le seòrsachadh IUCN air sgàth a chuairteachadh farsaing agus fulangas air diofar àrainnean18.
Chaidh aithris air buaidhean sublethal ann am muir-thìrich às deidh dhaibh a bhith fosgailte do cypermethrin, a’ toirt a-steach atharrachaidhean giùlain, moirfeòlais agus bith-cheimiceach ann an ceann-phollain23,24,25, bàsmhorachd atharraichte agus ùine metamorphosis, atharrachaidhean eunzymatic, lughdaich soirbheachas goir24,25, mòr-ghnìomhachd26, casg air gnìomhachd cholinesterase27 agus atharrachaidhean ann an coileanadh snàmh7,28. Ach, tha sgrùdaidhean air na buaidhean genotoxic aig cypermethrin ann am muir-thìrich cuingealaichte. Mar sin, tha e cudromach measadh a dhèanamh air cho buailteach ‘s a tha gnè anuran ri cypermethrin.
Tha truailleadh na h-àrainneachd a’ toirt buaidh air fàs is leasachadh àbhaisteach muir-thìrich, ach ’s e an droch bhuaidh as miosa am milleadh ginteil air DNA a dh’ adhbharaicheas nochdadh puinnsean-bhiastagan13. Tha mion-sgrùdadh morf-eòlas cealla-fala na bhith-chomharran cudromach air truailleadh agus puinnseanta a dh’fhaodadh a bhith aig stuth do ghnèithean fiadhaich29. Is e an deuchainn micronucleus aon de na dòighean as cumanta airson a bhith a’ dearbhadh genotoxicity cheimigean san àrainneachd30. Is e dòigh luath, èifeachdach agus saor a th’ ann a tha na dheagh chomharra air truailleadh ceimigeach fàs-bheairtean leithid muir-thìrich31,32 agus a bheir seachad fiosrachadh mu bhith fosgailte do thruaillearan genotoxic33.
B’ e amas an sgrùdaidh seo measadh a dhèanamh air comas puinnseanta cumaidhean cypermethrin malairteach gu ceann-pollain beaga uisge a’ cleachdadh deuchainn micronucleus agus measadh cunnairt eag-eòlasach.
Bàsmhorachd tionalach (%) de chinn-phòla P. gracilis fosgailte do dhiofar cho-chruinneachaidhean de cypermethrin malairteach rè ùine chruaidh na deuchainn.
Bàsmhorachd tionalach (%) de chinn-phòla P. gracilis fosgailte do dhiofar cho-chruinneachaidhean de cypermethrin malairteach rè deuchainn leantainneach.
Bha am bàsmhorachd àrd a chaidh fhaicinn mar thoradh air buaidhean genotoxic ann am muir-thìrich a bha fosgailte do dhiofar chruinneachaidhean de cypermethrin (6 agus 20 μg / L), mar a chithear le làthaireachd micronuclei (MN) agus ana-cainnt niùclasach ann an erythrocytes. Tha cruthachadh MN a’ comharrachadh mhearachdan ann am mitosis agus tha e co-cheangailte ri droch cheangal chromosomes ri microtubules, uireasbhaidhean ann an iom-fhilltean pròtain le uallach airson cleachdadh chromosomes agus còmhdhail, mearachdan ann an sgaradh chromosome agus mearachdan ann an càradh milleadh DNA38,39 agus dh’ fhaodadh gu bheil e co-cheangailte ri cuideam oxidative air adhbhrachadh le puinnseanan40,41. Chaidh eas-òrdughan eile fhaicinn aig a h-uile dùmhlachd a chaidh a mheasadh. Le bhith ag àrdachadh co-chruinneachaidhean cypermethrin mheudaich ana-cainnt niùclasach ann an erythrocytes le 5% agus 20% aig na dòsan as ìsle (1 μg / L) agus as àirde (20 μg / L), fa leth. Mar eisimpleir, faodaidh atharrachaidhean ann an DNA gnè buaidh mhòr a thoirt air an dà chuid mairsinneachd geàrr-ùine agus fad-ùine, a’ leantainn gu crìonadh sluaigh, fallaineachd gintinn atharraichte, inbreeding, call iomadachd ginteil, agus ìrean imrich atharraichte. Faodaidh na factaran sin uile buaidh a thoirt air mairsinn agus cumail suas ghnèithean42,43. Dh’ fhaodadh cruthachadh neo-riaghailtean erythroid comharrachadh bloc ann an cytokinesis, a’ leantainn gu roinneadh cealla neo-àbhaisteach (erythrocytes binucleated)44,45; tha nèimheasan ioma-lobach a’ toirt a-mach an membran niùclasach le ioma lobes46, agus dh’ fhaodadh gum bi ana-cainnt erythroid eile co-cheangailte ri leudachadh DNA, leithid dubhagan niùclasach / bleibean47. Is dòcha gu bheil làthaireachd erythrocytes anucleated a’ nochdadh droch ghiùlan ocsaidean, gu sònraichte ann an uisge truaillte48,49. Tha apoptosis a’ comharrachadh bàs cealla50.
Tha sgrùdaidhean eile cuideachd air sealltainn na buaidhean genotoxic aig cypermethrin. Sheall Kabaña et al.51 làthaireachd micronuclei agus atharrachaidhean niùclasach leithid ceallan binucleated agus ceallan apoptotic ann an ceallan Odontophrynus americanus às deidh dhaibh nochdadh gu dùmhlachdan àrda de cypermethrin (5000 agus 10,000 μg L−1) airson 96 h. Chaidh apoptosis air a bhrosnachadh le Cypermethrin a lorg cuideachd ann am P. biligonigerus52 agus Rhinella arenarum53. Tha na co-dhùnaidhean sin a’ moladh gu bheil buaidhean genotoxic aig cypermethrin air raon de fhàs-bheairtean uisgeach agus gum faodadh am measadh MN agus ENA a bhith nan comharra air buaidhean sublethal air muir-thìrich agus gum faodadh e a bhith buntainneach do ghnèithean dùthchasach agus àireamhan fiadhaich a tha fosgailte do phuinnseanan12.
Tha cruthachaidhean malairteach de cypermethrin nan cunnart àrainneachdail àrd (an dà chuid gann agus leantainneach), le prìomh oifisean nas àirde na ìre 54 Buidheann Dìon Àrainneachd na SA (EPA) a dh’ fhaodadh droch bhuaidh a thoirt air a ’ghnè ma tha e an làthair san àrainneachd. Anns a’ mheasadh cunnairt leantainneach, b’ e an NOEC airson bàsmhorachd 3 μg L−1, a’ dearbhadh gum faodadh na dùmhlachdan a gheibhear ann an uisge a bhith nan cunnart don ghnè55. B’ e an NOEC marbhtach airson larbha R. arenarum a bha fosgailte do mheasgachadh de endosulfan agus cypermethrin 500 μg L−1 às deidh 168 h; chaidh an luach seo sìos gu 0.0005 μg L -1 às deidh 336 h. Tha na h-ùghdaran a 'sealltainn mar as fhaide a tha an nochd, nas ìsle na co-chruinneachaidhean a tha cronail don ghnè. Tha e cuideachd cudromach a chomharrachadh gu robh luachan NOEC nas àirde na luachan P. gracilis aig an aon àm nochdaidh, a 'sealltainn gu bheil freagairt gnè do cypermethrin sònraichte do ghnèithean. A bharrachd air an sin, a thaobh bàsmhorachd, ràinig luach CHQ P. gracilis às deidh a bhith fosgailte do cypermethrin 64.67, a tha nas àirde na an luach iomraidh a shuidhich Buidheann Dìon Àrainneachd na SA54, agus bha luach CHQ larbha R. arenarum cuideachd nas àirde na an luach seo (CHQ> 388.00 às deidh 336 h), a’ nochdadh gu bheil grunn ghnèithean aphibian a chaidh a sgrùdadh ann an cunnart àrd. Leis gu bheil feum aig P. gracilis timcheall air 30 latha gus metamorphosis a chrìochnachadh56, faodar a cho-dhùnadh gum faodadh an dùmhlachd sgrùdaichte de cypermethrin cur ri crìonadh sluaigh le bhith a’ cur casg air daoine le galair bho bhith a’ dol a-steach don ìre inbheach no gintinn aig aois òg.
Anns a’ mheasadh cunnairt àireamhaichte air micronuclei agus ana-cainnt niuclasach erythrocyte eile, bha luachan CHQ eadar 14.92 agus 97.00, a’ nochdadh gun robh cunnart genotoxic aig cypermethrin do P. gracilis eadhon san àrainn nàdarra aige. A’ gabhail a-steach bàsmhorachd, b’ e 4.24 μg L−1 an ìre as àirde de choimeasgaidhean xenobiotic a ghabhadh ri P. gracilis. Ach, sheall dùmhlachdan cho ìosal ri 1 μg/L cuideachd buaidhean genotoxic. Dh’ fhaodadh an fhìrinn seo leantainn gu àrdachadh san àireamh de dhaoine neo-àbhaisteach57 agus buaidh a thoirt air leasachadh agus ath-riochdachadh gnèithean nan àrainnean, a’ leantainn gu crìonadh ann an àireamhan muir-thìrich.
Sheall cruthachaidhean malairteach den insecticide cypermethrin puinnseanta àrd agus leantainneach do P. gracilis. Chaidh ìrean bàsmhorachd nas àirde fhaicinn, is dòcha mar thoradh air buaidhean puinnseanta, mar a chithear bho làthaireachd micronuclei agus ana-cainnt niuclasach erythrocyte, gu sònraichte niuclasan serrated, niuclas lobed, agus niuclasan vesicular. A bharrachd air an sin, sheall na gnèithean a chaidh a sgrùdadh barrachd chunnartan àrainneachdail, an dà chuid gann agus leantainneach. Sheall an dàta seo, còmhla ri sgrùdaidhean roimhe leis a’ bhuidheann rannsachaidh againn, gun do dh’ adhbhraich eadhon diofar chruthan malairteach de cypermethrin gnìomhachd acetylcholinesterase (AChE) agus butyrylcholinesterase (BChE) agus cuideam oxidative58, agus mar thoradh air sin thàinig atharrachaidhean ann an gnìomhachd snàmh agus mì-chòmhraidhean beòil59 ann am P. gracilis, a’ nochdadh gu bheil foirmlean malairteach de shàr-thocsaineachd agus fo-thocsaineachd aig a’ ghnè seo. Hartmann et al. Fhuair 60 a-mach gur e cruthachaidhean malairteach de cypermethrin an fheadhainn as puinnseanta do P. gracilis agus gnè eile den aon sheòrsa (P. cuvieri) an coimeas ri naoi puinnseanan eile. Tha seo a’ moladh gum faodadh dùmhlachdan de cypermethrin a chaidh aontachadh gu laghail airson dìon na h-àrainneachd leantainn gu bàsmhorachd àrd agus crìonadh sluaigh san fhad-ùine.
Tha feum air tuilleadh sgrùdaidhean gus puinnseanta puinnsean-bhiastagan do mhuir-thìrich a mheasadh, oir faodaidh na dùmhlachdan a gheibhear san àrainneachd bàsmhorachd àrd adhbhrachadh agus cunnart a thoirt do P. gracilis. Bu chòir rannsachadh air gnèithean muir-thìrich a bhrosnachadh, leis gu bheil dàta air na fàs-bheairtean sin gann, gu sònraichte air gnèithean Brazilach.
Mhair an deuchainn puinnseanta cronail airson 168 h (7 latha) fo chumhachan statach agus b’ e na dùmhlachdan sublethal: 1, 3, 6 agus 20 μg ai L−1. Anns an dà dheuchainn, chaidh 10 ceann-phollain gach buidheann làimhseachaidh a mheasadh le sia mac-samhail, airson 60 ceann-phollain gu h-iomlan airson gach dùmhlachd. Aig an aon àm, bha an làimhseachadh uisge a-mhàin na smachd àicheil. Anns gach suidheachadh deuchainneach bha mias glainne sterile le comas 500 ml agus dùmhlachd de 1 ceann-pollain gach 50 ml de fhuasgladh. Bha am flasg air a chòmhdach le film polyethylene gus casg a chuir air falmhachadh agus bha e air a theasachadh gu leantainneach.
Chaidh an t-uisge a sgrùdadh gu ceimigeach gus co-chruinneachaidhean puinnseanan a dhearbhadh aig 0, 96, agus 168 h. A rèir Sabin et al. 68 agus Martins et al. 69 , chaidh na mion-sgrùdaidhean a dhèanamh aig Saotharlann Mion-sgrùdadh puinnseanan (LARP) aig Oilthigh Feadarail Santa Maria a’ cleachdadh cromatagrafaidheachd gas còmhla ri mòr-speactrometry ceithir-cheàrnach (modail Varian 1200, Palo Alto, California, USA). Tha an co-dhùnadh cainneachdail de phuinnseanan ann an uisge air a shealltainn mar stuth leasachail (Clàr SM1).
Airson an deuchainn micronucleus (MNT) agus deuchainn ana-cainnt niùclasach cealla dearga (RNA), chaidh 15 ceann-phollain bho gach buidheann làimhseachaidh a sgrùdadh. Chaidh anesthetized a dhèanamh air tadpoles le 5% lidocaine (50 mg g-170) agus chaidh sampallan fala a chruinneachadh le puncture cridhe a’ cleachdadh steallairean heparinized cuidhteasach. Chaidh smearan fala ullachadh air sleamhnagan miocroscop sterile, air an tiormachadh le èadhar, air an suidheachadh le 100% methanol (4 ° C) airson 2 min, agus an uairsin air a dhath le fuasgladh 10% Giemsa airson 15 min anns an dorchadas. Aig deireadh a 'phròiseis, chaidh na sleamhnagan a nighe le uisge grùide gus cus stain a thoirt air falbh agus a thiormachadh aig teòthachd an t-seòmair.
Chaidh co-dhiù 1000 RBC bho gach ceann-phollain a sgrùdadh a’ cleachdadh miocroscop 100 × le amas 71 gus faighinn a-mach an robh MN agus ENA ann. Chaidh measadh a dhèanamh air 75,796 RBC bho cheann-phollain a’ beachdachadh air dùmhlachdan agus smachdan cypermethrin. Chaidh genotoxicity a sgrùdadh a rèir dòigh Carrasco et al. agus Fenech et al.38,72 le bhith a’ dearbhadh tricead nan leòintean niùclasach a leanas: (1) ceallan anucleate: ceallan gun nuclei; (2) ceallan apoptotic: briseadh niùclasach, bàs cealla prògramaichte; (3) ceallan binucleate: ceallan le dà nuclei; (4) gucagan niuclasach no ceallan bleb: ceallan le nèimheasan le sruthan beaga den membran niùclasach, bleibean coltach ri meud micronuclei; (5) ceallan karyolyzed: ceallan anns nach eil ach dealbh den niuclas gun stuth a-staigh; (6) ceallan le notched: ceallan le nèimheasan le sgàinidhean follaiseach no sràcan nan cumadh, ris an canar cuideachd niuclas ann an cumadh dubhaig; (7) ceallan lobulated: ceallan le toradh niùclasach nas motha na na bileagan a chaidh ainmeachadh; agus (8) microcells: ceallan le nèimhean co-dhlùthaichte agus cytoplasm nas lugha. Chaidh coimeas a dhèanamh eadar na h-atharrachaidhean agus na toraidhean smachd àicheil.
Chaidh na toraidhean deuchainn acute puinnseanta (LC50) a sgrùdadh a’ cleachdadh bathar-bog GBasic agus modh TSK-Trimmed Spearman-Karber74. Chaidh an dàta deuchainn cronail a dhearbhadh ro-làimh airson riaghailteachd mearachd (Shapiro-Wilks) agus aon-ghnè eadar-dhealachaidh (Bartlett). Chaidh na toraidhean a sgrùdadh le bhith a’ cleachdadh mion-sgrùdadh aon-shligheach air caochlaidheachd (ANOVA). Chaidh deuchainn Tukey a chleachdadh gus coimeas a dhèanamh eadar dàta eatorra fhèin, agus chaidh deuchainn Dunnett a chleachdadh gus coimeas a dhèanamh eadar dàta eadar a’ bhuidheann làimhseachaidh agus a’ bhuidheann smachd àicheil.
Chaidh dàta LOEC agus NOEC a sgrùdadh a’ cleachdadh deuchainn Dunnett. Chaidh deuchainnean staitistigeil a dhèanamh a’ cleachdadh bathar-bog Statistica 8.0 (StatSoft) le ìre cudromachd de 95% (p <0.05).
Ùine puist: Mar-13-2025