Tha pròtanan DELLA mar mhaighstir glèidhteriaghladairean fàisaig a bheil prìomh àite ann a bhith a’ cumail smachd air leasachadh lusan mar fhreagairt air sanasan a-staigh agus àrainneachd. Tha DELLA ag obair mar riaghlaiche tar-sgrìobhaidh agus tha e air fhastadh gus cuimseachadh air luchd-adhartachaidh le bhith a’ ceangal ri factaran tar-sgrìobhaidh (TFn) agus histone H2A tron àrainn GRAS aige. Tha sgrùdaidhean o chionn ghoirid air sealltainn gu bheil seasmhachd DELLA air a riaghladh an dèidh eadar-theangachadh tro dhà dhòigh: polyubiquitination air a bhrosnachadh leis a’ phytohormone gibberellin, a tha a’ leantainn gu a dhì-chothromachadh luath, agus co-luachadh atharraichean beaga coltach ri ubiquitin (SUMO) gus an cruinneachadh aca a mheudachadh. A bharrachd air an sin, tha gnìomhachd DELLA air a riaghladh gu dinamach le dà glycosylation eadar-dhealaichte: tha eadar-obrachadh DELLA-TF air a neartachadh le O-fucosylation ach air a bhacadh le atharrachadh N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) ceangailte le O. Ach, tha àite phosphorylation DELLA fhathast neo-shoilleir, leis gu bheil sgrùdaidhean roimhe air toraidhean connspaideach a nochdadh, a’ dol bhon fheadhainn a sheall gu bheil fosphorylation a’ brosnachadh no a’ lughdachadh truailleadh DELLA gu feadhainn eile a’ sealltainn nach eil fosphorylation a’ toirt buaidh air seasmhachd. An seo, bidh sinn a’ comharrachadh làraich fosphorylation ann an REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) air a ghlanadh bho Arabidopsis thaliana le mion-sgrùdadh mòr-speactrometry agus a’ sealltainn gu bheil fosphorylation de dhà pheptid RGA aig roinnean PolyS agus PolyS / T a’ brosnachadh gnìomhachd H2A ceangail agus leasaichte RGA. Comann RGA le luchd-adhartachaidh targaid. Gu sònraichte, chan eil fosphorylation a’ toirt buaidh air eadar-obrachaidhean RGA-TF no seasmhachd RGA. Tha an sgrùdadh againn a’ nochdadh an uidheamachd moileciuil leis am bi fosphorylation ag adhbhrachadh gnìomhachd DELLA.
Gus àite fosphorylation ann a bhith a’ riaghladh gnìomh DELLA a shoilleireachadh, tha e deatamach làraich phosphorylation DELLA a chomharrachadh ann am vivo agus mion-sgrùdaidhean gnìomh a dhèanamh ann an planntaichean. Le bhith a’ glanadh cleamhnas de earrannan planntrais agus an uairsin mion-sgrùdadh MS/MS, chomharraich sinn grunn phosphosites ann an RGA. Fo chumhachan dìth GA, bidh fosphorylation RHA ag àrdachadh, ach chan eil fosphorylation a’ toirt buaidh air seasmhachd. Gu cudromach, nochd measaidhean co-IP agus ChIP-qPCR gu bheil fosphorylation aig sgìre PolyS / T de RGA a ’brosnachadh a h-eadar-obrachadh le H2A agus an ceangal a th’ aige ri luchd-adhartachaidh targaid, a ’nochdadh an dòigh anns am bi fosphorylation a’ toirt a-steach gnìomh RGA.
Tha RGA air fhastadh gus cuimseachadh air cromatin tro eadar-obrachadh an fho-àrainn LHR1 le TF agus an uairsin a’ ceangal ri H2A tron roinn PolyS / T agus fo-àrainn PFYRE, a’ cruthachadh ionad H2A-RGA-TF gus RGA a dhèanamh seasmhach. Bidh fosphorylation of Pep 2 ann an roinn PolyS / T eadar àrainn DELLA agus fearann GRAS le kinase neo-aithnichte ag àrdachadh ceangal RGA-H2A. Bidh am pròtain rgam2A mutant a ’cur às do phosphorylation RGA agus a’ gabhail ri co-chòrdadh pròtain eadar-dhealaichte gus casg a chuir air ceangal H2A. Tha seo a’ leantainn gu neo-sheasmhachd eadar-obrachaidhean TF-rgam2A neo-ghluasadach agus dissociation rgam2A bho chromatin targaid. Tha am figear seo a’ sealltainn dìreach ro-aithris tar-sgrìobhaidh le meadhan RGA. Dh’ fhaodadh pàtran coltach ris a bhith air a mhìneachadh airson gnìomhachd tar-sgrìobhaidh le meadhan RGA, ach a-mhàin gun toireadh an t-ionad H2A-RGA-TF air adhart tar-sgrìobhadh gine targaid agus dephosphorylation de rgam2A lùghdachadh tar-sgrìobhadh. Figear air atharrachadh bho Huang et al.21.
Chaidh a h-uile dàta cainneachdail a sgrùdadh gu staitistigeil a’ cleachdadh Excel, agus chaidh eadar-dhealachaidhean mòra a dhearbhadh a’ cleachdadh deuchainn t Oileanach. Cha deach dòighean staitistigeil a chleachdadh gus meud an t-sampall a dhearbhadh ro-làimh. Cha deach dàta sam bith a chuir a-mach às an anailis; cha deach an deuchainn a dhèanamh air thuaiream; cha robh an luchd-rannsachaidh dall air sgaoileadh dàta rè an deuchainn agus measadh nan toraidhean. Tha meud an t-sampall air a chomharrachadh anns an uirsgeul figear agus am faidhle dàta stòr.
Airson tuilleadh fiosrachaidh mu dhealbhadh an sgrùdaidh, faic Geàrr-chunntas Aithisg Pasgan Nàdarra co-cheangailte ris an artaigil seo.
Chaidh dàta proteomics spectrometry mòr a chuir ris a’ cho-bhanntachd ProteomeXchange tro stòr com-pàirtiche PRIDE66 le aithnichear stòr-dàta PXD046004. Tha a h-uile dàta eile a gheibhear tron sgrùdadh seo air a thaisbeanadh anns an Fiosrachadh Leasachail, Faidhlichean Dàta Leasachail, agus Faidhlichean Dàta Raw. Tha stòr-dàta air a thoirt seachad airson an artaigil seo.
Ùine puist: Samhain-08-2024